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测叶绿素的要领 m)的比例加入蒸馏水

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  叶绿素是高等植物和其它所有能举行

  光相助用的生物体含有的一类绿色色素,是植物举行

  光相助用时必须的催化剂,一样平常

  情形

  下可以用极性溶剂如丙酮、甲醇、乙醇、乙酸乙酯等提取叶绿素。今天就给各人分享一下在水果、蔬菜及其制品中怎样

  通太过光光度法来测定叶绿素的含量。

  1.规模

  本尺度划定了分光光度法测定水果、蔬菜及其制品中叶绿素含量的要领。

  本尺度适用于水果、蔬菜及其制品中叶绿素a含量、叶绿素b含量和叶绿素总含量的测定。

  本尺度要领中叶绿素a的线性规模为0.004 mg/g ~0.018 mg/ g,叶绿素b的线性规模为0.005mg/g~0.020mg/g。

  2.原理

  试样中的叶绿素用无水乙醇和丙酮1测叶绿素的方法:1(V :V)混淆液提取,试液划分测定645nm和663 nm处吸光度值,使用

  Arnon公式盘算试样叶绿素含量。

  3.试剂

  除非尚有

  说明,所用水为(GB/T 6682 剖析

  实验室用水规格和试验要领)中划定的三级水及以上,试剂均为剖析

  纯试剂。

  3.1无水乙醇。

  3.2 丙酮。

  3.3提取剂:无水乙醇和丙酮1:1(V:V)混淆液。

  4.仪器

  4.1 分光光度计。

  4.2剖析

  天平(±0.01g)。

  4.3高速组织捣碎机:0 r/ min~2 000r/ min。

  5. 剖析

  步骤

  5.1试样制备

  5.1.1含水量较多的样品

  取代表性样品,切碎,混匀,用组织捣碎机制成匀浆,备用。

  5.1.2 含水量较少的制品

  取代表性样品,按1:1(m : m)的比例加入蒸馏水,用组织捣碎机制成匀浆,备用。

  5.2试液制备

  深绿色样品、准确称取0.5g试样于三角瓶中,加人100 mL提取剂。绿色样品,准确称取0.5g试样于三角瓶中,加入10mL提取剂。浅绿色样品,称取2.0g~5.0g试样于三角瓶中,加入10mL提取剂。三角瓶用封口膜密封,室温下避光静置提取5 h,过滤,滤液待测。

  注重

  :光照和高温会使叶绿素发生氧化和剖析,试液制备时应阻止

  高温顺

  光照。

  5.3试液的测定

  以提取剂为空缺

  溶液,凋零点。划分在645nm和663nm处测定试液的吸光度值。

  6.效果

  盘算

  试样中叶绿素a含量、叶绿素b含量和叶绿素总含量均以质量分数w体现,单元为毫克每克(mg/g),划分按式(1)、式(2)和式(3)盘算。

  W1=(12.72×A1-2.59×A2)×v/(1000×m).........(1)

  式中:

  W1------叶绿素a含量,单元为毫克每克(mg/g)测叶绿素的方法;

  A1------试液在663nm处的吸光值;

  A2------试液在645nm处的吸光值;

  v------试液体积,单元为毫升(mL);

  m------试液质量,单元为克(g)。

  盘算效果

  保留3位有用

  数字。

  W2=(22.88×A2-4.67×A1)×v/(1000×m)..........(2)

  式中:

  W2------叶绿素b含量,单元为毫克每克(mg/g)

  盘算效果

  保留3位有用

  数字。

  W3=(8.05×A1+20.29×A2)×v/(1000×m)........(3)

  W3------叶绿素总含量,单元为毫克每克(mg/g)

  盘算效果

  保留3位有用

  数字。

  7. 细密

  度

  在重复性条件下获得的2次自力

  测定效果

  的绝对差值不大于这2个测定值算术平均值的10%。

  要领整理:栢晖生物


标签: 叶绿素含量