叶绿素是高等植物和其它所有能举行
光相助用的生物体含有的一类绿色色素,是植物举行
光相助用时必须的催化剂,一样平常
情形
下可以用极性溶剂如丙酮、甲醇、乙醇、乙酸乙酯等提取叶绿素。今天就给各人分享一下在水果、蔬菜及其制品中怎样
通太过光光度法来测定叶绿素的含量。
1.规模
本尺度划定了分光光度法测定水果、蔬菜及其制品中叶绿素含量的要领。
本尺度适用于水果、蔬菜及其制品中叶绿素a含量、叶绿素b含量和叶绿素总含量的测定。
本尺度要领中叶绿素a的线性规模为0.004 mg/g ~0.018 mg/ g,叶绿素b的线性规模为0.005mg/g~0.020mg/g。
2.原理
试样中的叶绿素用无水乙醇和丙酮1测叶绿素的方法:1(V :V)混淆液提取,试液划分测定645nm和663 nm处吸光度值,使用
Arnon公式盘算试样叶绿素含量。
3.试剂
除非尚有
说明,所用水为(GB/T 6682 剖析
实验室用水规格和试验要领)中划定的三级水及以上,试剂均为剖析
纯试剂。
3.1无水乙醇。
3.2 丙酮。
3.3提取剂:无水乙醇和丙酮1:1(V:V)混淆液。
4.仪器
4.1 分光光度计。
4.2剖析
天平(±0.01g)。
4.3高速组织捣碎机:0 r/ min~2 000r/ min。
5. 剖析
步骤
5.1试样制备
5.1.1含水量较多的样品
取代表性样品,切碎,混匀,用组织捣碎机制成匀浆,备用。
5.1.2 含水量较少的制品
取代表性样品,按1:1(m : m)的比例加入蒸馏水,用组织捣碎机制成匀浆,备用。
5.2试液制备
深绿色样品、准确称取0.5g试样于三角瓶中,加人100 mL提取剂。绿色样品,准确称取0.5g试样于三角瓶中,加入10mL提取剂。浅绿色样品,称取2.0g~5.0g试样于三角瓶中,加入10mL提取剂。三角瓶用封口膜密封,室温下避光静置提取5 h,过滤,滤液待测。
注重
:光照和高温会使叶绿素发生氧化和剖析,试液制备时应阻止
高温顺
光照。
5.3试液的测定
以提取剂为空缺
溶液,凋零点。划分在645nm和663nm处测定试液的吸光度值。
6.效果
盘算
试样中叶绿素a含量、叶绿素b含量和叶绿素总含量均以质量分数w体现,单元为毫克每克(mg/g),划分按式(1)、式(2)和式(3)盘算。
W1=(12.72×A1-2.59×A2)×v/(1000×m).........(1)
式中:
W1------叶绿素a含量,单元为毫克每克(mg/g)测叶绿素的方法;
A1------试液在663nm处的吸光值;
A2------试液在645nm处的吸光值;
v------试液体积,单元为毫升(mL);
m------试液质量,单元为克(g)。
盘算效果
保留3位有用
数字。
W2=(22.88×A2-4.67×A1)×v/(1000×m)..........(2)
式中:
W2------叶绿素b含量,单元为毫克每克(mg/g)
盘算效果
保留3位有用
数字。
W3=(8.05×A1+20.29×A2)×v/(1000×m)........(3)
W3------叶绿素总含量,单元为毫克每克(mg/g)
盘算效果
保留3位有用
数字。
7. 细密
度
在重复性条件下获得的2次自力
测定效果
的绝对差值不大于这2个测定值算术平均值的10%。
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