知道引物怎么确定pcr产物的长度
1、引物长度一般为15-30bp,常用的为18-27bp,但不能大于38bp; 2、引物GC含量一般为40%-60%,以45-55%为宜,上下游引物GC含量和Tm值要保持接近; 3、引物所对应的模板序列的Tm值最好在72℃左右,至少要在55-80℃之间,Tm值曲线以选取72度附近为佳。
PCR是扩增数目的。 目的基因有700多,扩增产物长度只有200. 这个就是引物选择的问题了。引物决定了扩增的起始位置,如果你选择的引物正好是500以后的位置,那么扩增产物长度就只有200了。
知道了引物,并且有这条序列,就是gene map,在gene map里面找到这对primer的位置,primer之间的bp数(就是多少个AGCT)就是产物的size (bp数)
正向引物和反向引物是用来确定扩增基因片段的起点和终点。另外,必须有一段核酸与模板结合后才能引发新链的延伸 合成你需要的基因片段,这两个引物就是用来引发延伸同时确定起点和终点的
pcr停滞 你怎么知道的?机器显示的是什么状态?
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